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微生物培養之甲烷氧化菌細菌培養

發布時間:2025/11/8點擊次數:48

?甲烷氧化菌是一類能夠利用甲烷作為碳源和能量的特殊微生物。它們廣泛分布于土壤、濕地和海洋等環境中,是自然界中控制甲烷排放的關鍵生物過濾器。研究該類微生物對于緩解溫室效應、開發生物減排技術以及理解全球碳循環過程具有重要科學和應用價值。


一、常用配置:

  • 溫度:25~30℃

  • 轉速:120~180rpm

  • 培養瓶規格:100~250ml


二、方案原理:

典型場景:甲烷氧化菌的富集培養研究


配置參數與原理:

  • 溫度:25~30℃

甲烷氧化菌是一類對溫度條件較為敏感的微生物,其生長適宜溫度因菌種差異而有所不同。通常來說,這類微生物最適宜在25℃至30℃的環境中生長。當溫度低于20℃或超過35℃時,其生長狀態、代謝活性及生理功能均可能受到抑制。多項研究結果表明,在25℃–30℃的培養條件下,甲烷氧化菌能夠表現出較高的甲烷氧化效率與較快的生長速率。因此,在溫室培養土中,將溫度控制在該區間內,有助于優化其培養效果。

  • 轉速:120~180rpm

甲烷培養:采用250m1三角搖瓶,裝100m無機鹽培養基,菌體接種量10%(V/V),使用帶有玻璃管的膠塞封口。在上層的空氣中置換入甲烷,甲烷和空氣體積比為1:1-1:5,28℃、180rpm 空氣浴搖床培養。每 24h 換氣一次。

提速方法:1.可以加入甲醇,提供充分的碳源,從而提高細胞密度。最佳添加量為0.05%(V/V)。2.可以加入石蠟油,作為一種甲烷傳遞體,提高甲烷的利用率。最佳添加量為2.5%(V/V)


文獻出處:[1]辛嘉英, 董靜, 梁洪野, 張帥, 王艷, & 夏春谷. (2010). 甲烷氧化菌的高密度培養.

其他實驗要求也有提到:“樣本在30℃、120/min的恒溫培養箱內恒溫振蕩浸泡48h后取出,這樣的操作。"

  • 培養瓶規格:100~250ml

在實驗室搖瓶培養中,選擇100-250 mL容器(如錐形瓶)并控制裝液量(如50 mL/250 mL),是為了優化氧氣和甲烷的傳輸效率。該規格能在搖動時形成最佳氣液界面,提供充足氣體交換,防止濺出,并兼顧操作便利性與成本,是滿足這類高耗氧微生物生長需求的理想規模。



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